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Artículo recibido 15 de febrero de 2024
Artículo aceptado 15 de mayo de 2024
Artículo publicado 31 de octubre de 2024
Análisis micrográfico cuali-cuantitativo de plantas medicinales
utilizadas para el tratamiento del cáncer en la provincia de Misiones
Chaihort, Marcelo L; Altamirano, Carlos G.; Florentín, Paul. A.
Laboratorio de Farmacobotánica “Dr. Aníbal Amat” de la Facultad de Ciencias Exactas,
Químicas y Naturales de la Universidad Nacional de Misiones.
cgaltamirano@fceqyn.unam.edu.ar
ORCID Marcelo L. Chaihort 0009-0000-6115-8512
ORCID Carlos G. Altamirano 0000-0001-9426-7993
ORCID Paul A. Florentín 0009-0005-0414-2289
Resumen
El uso y comercialización de especies vegetales como agentes terapéuticos en la
medicina popular en la provincia de Misiones se fue acrecentando con el paso del
tiempo. Dado que se las conoce y comercializa principalmente por su nombre vulgar, la
correcta identificación de dichas especies es un aporte importante para el control de la
calidad. En Misiones, la mortalidad por tumores se ubica como segunda causa de
muerte en la población, representando el 18,20% de las muertes totales. Se
determinaron 4 especies utilizadas en forma empírica: Polygonum punctatum,
Polygonum hydropiperoides Michx. var. setaceum, Acanthospermum australe, y
Xanthium strumarium. La droga vegetal en todos los casos es la parte aérea en forma de
decocción o infusión. Para el ensayo se seleccionaron hojas en su óptimo estado de
desarrollo utilizando un diafanizado. Las observaciones se realizaron con microscopio
óptico con una cámara Moticam10. Los Índices de Estomas e Índices de Empalizada se
realizaron considerando un área de 0.4 mm2. Los resultados se procesaron en Microsoft
Excel versión 2016, obteniendo la media y el desvío estándar. El trabajo realizado tiene
como finalidad aportar datos de carácter cuantitativo, que a futuro podrían servir de
sustento para la caracterización micrográfica de las especies en cuestión.
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Palabras clave: cáncer, plantas medicinales, micrografía cuali-cuantitativa.
Abstract
Qualitative-quantitative micrographic analysis of medicinal plants used for the
treatment of Cancer in the Province of Misiones
The use and commercialization of plant species as a therapeutic agent in popular
medicine in the Province of Misiones increased over time. Since they are known and
marketed mainly by their common name, the correct identification of these species is an
important contribution to quality control. In Misiones, mortality from tumors is the
second cause of death in the population, representing 18.20% of total deaths. Four
species used empirically were determined: Polygonum punctatum, Polygonum
hydropiperoides Michx. var. setaceum, Acanthospermum australe, and Xanthium
strumarium. The plant drug in all cases is the aerial part in the form of a decoction or
infusion. For the test, leaves were selected in their optimal state of development, using a
diaphanous coating. The observations were made with an optical microscope with a
Moticam10 Camera. The Stomatal Indices and Palisade Indices were carried out
considering an area of 0.4 mm2. The results were processed in Microsoft Excel version
2016, obtaining the mean and standard deviation. The purpose of the work carried out is
to provide quantitative data, which in the future could serve as support for the
micrographic characterization of the species in question.
Keywords: quality cancer, medicinal plants, qualitative-quantitative micrography.
INTRODUCCIÓN
El uso de estos agentes terapéuticos se halla ampliamente difundido en todos
los niveles sociales encuestados y no solamente en los sectores de menores ingresos o
de menor nivel cultural como sería de esperar según los patrones conocidos en
Argentina. Sin embargo, en estos últimos grupos sociales las plantas medicinales (sobre
todo las de procedencia silvestre) constituyen casi el único medicamento accesible
debido al alto costo de las especialidades y a las falencias del sistema de salud vigente
(Amat, Yajia, 1991).
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En la provincia de Misiones la realidad de la articulación entre el servicio
médico-formal de la Atención Primaria de la Salud y la Fitoterapia popular es compleja
y responde a parámetros culturales y naturales propios de la región. No son ajenos a ella
el origen de la población (formada por aborígenes, criollos, inmigrantes de países
limítrofes y europeos, y sus descendientes) y la riqueza de recursos naturales que el
medio provee (Amat, Yajia, 1991).
La mortalidad por tumores se ubica como segunda causa de muerte en la
población de Misiones, representando el 18,20% de las muertes totales y una tasa bruta
de mortalidad de 106,91 cada 100 mil habitantes, donde el cáncer de tráquea, bronquios
y pulmón es el de mayor impacto (209 defunciones totales en 2017), seguido por los de
la categoría de colon, de mama, próstata y útero (Mrio Salud Pública, 2018).
«Cáncer» es un término genérico que designa un amplio grupo de
enfermedades que pueden afectar a cualquier parte del organismo; también se habla de
«tumores malignos» o «neoplasias malignas». Una característica definitoria del cáncer
es la multiplicación rápida de células anormales que se extienden más allá de sus límites
habituales y pueden invadir partes adyacentes del cuerpo o propagarse a otros órganos,
un proceso que se denomina «metástasis». Las metástasis son la principal causa de
muerte por cáncer (OMS, 2018).
Con respecto a la terapéutica, observamos que la mayoría de los medicamentos
contra el cáncer se han dirigido deliberadamente hacia objetivos moleculares
específicos, presentando actividad inhibitoria contra un objetivo al tiempo que tiene, en
principio, relativamente menos efectos fuera del objetivo.
Desde este punto de vista, resulta de interés estudiar las plantas medicinales
utilizadas en forma empírica, para acompañar los tratamientos farmacológicos
convencionales. Las mismas podrían actuar de diferentes maneras, no sólo a nivel de las
células tumorales, sino también sobre el “microambiente” (Hanahan, Weinberg, 2011).
La OMS apoya el uso de las medicinas tradicionales y alternativas cuando estas
han demostrado su utilidad para el paciente y representan un riesgo mínimo. Pero a
medida que aumenta el número de personas que utilizan esas medicinas, los gobiernos
deben contar con instrumentos para garantizar que todos los interesados dispongan de la
mejor información sobre sus beneficios y riesgos (OMS, 2004).
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La OMS publicó métodos de micrografía cuantitativa aplicados al control de
calidad para productos de origen vegetal en 1998, para ayudar a establecer estándares de
calidad como ser: Índice de Estomas, Índice o Proporción de Empalizada y el Método
de Wallis (OMS, 1998).
La micrografía constituye un riguroso método de análisis aplicable sobre todo a
productos vegetales, basado en el reconocimiento y la valoración cuali- cuantitativa de
sus elementos histológicos. Para ello se requiere una ejercitación previa en el manejo de
la microscopía y conocimientos básicos de Histología, Anatomía y Taxonomía Vegetal
(Spegazzini, 2007).
Los métodos cuantitativos consisten fundamentalmente en la determinación de
uno o más elementos histológicos por unidad de superficie, peso, etc., de esta manera
permite obtener valores característicos para el vegetal que se está analizando
(Spegazzini, 2007).
Por otro lado, en la Argentina han sido publicadas, entre los años 1993-1998 y
actualizados en 2017, una serie de Normas no oficiales, las NORMAS IRAM (37500 a
37518), producidas por el Instituto Argentino de Normalización aplicables a las
denominadas “hierbas medicinales” y que contemplan diversas técnicas y métodos de
análisis, normas que incluyen aspectos histológicos, histoquímicos, fitoquímicos y
farmacognósticos referidos al análisis de drogas vegetales.
Numerosas especies son utilizadas como agentes terapéuticos en el tratamiento
del cáncer en la provincia de Misiones, como ser Monteverdia ilicifolia conocida como
“cangorosa” (Junior y col., 2013), Annona muricata L. conocida como “Guanabana” o
“Graviola” (Morón Rodriguez y col., 2010), Moringa oleifera o “Moringa” (Al-Asmari
y col., 2015), de esta revisión surge el hecho de que las especies Acanthospermum
australe (Loefl.) Kuntze, Polygonum punctatum Elliot, Polygonum hydropiperoides
Michx. var. setaceum (Baldwin ex Elliott) Gleason y Xanthium strumarium L., cuentan
con escasos antecedentes detallados de su micrografía cuali-cuantitativa, por lo que son
objetos de estudio del presente trabajo.
Por lo antes expuesto, se plantea en el presente trabajo realizar el análisis
micrográfico cuali-cuantitativo de drogas vegetales relevadas que sean utilizadas en el
tratamiento del cáncer, a los fines de aportar caracteres de valor diagnóstico cualitativos
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y cuantitativos, aplicables al control de identidad de productos de origen vegetal, con
vistas a una posible aplicación de los mismos.
MATERIALES Y MÉTODOS
Selección de especies
La selección de especies se realizó luego de un exhaustivo relevamiento
bibliográfico, donde los criterios utilizados fueron sus usos etnobotánicos en el
tratamiento del cáncer, sin discriminar ningún tipo.
Procesamiento de las muestras
Luego del relevamiento, se encontraron diversas especies vegetales con
potenciales propiedades terapéuticas para el tratamiento complementario a la medicina
específica contra las enfermedades tumorales, de las cuales se seleccionaron para el
presente estudio: Polygonum punctatum Elliot, Polygonum hydropiperoides Michx. var.
setaceum (Baldwin ex Elliott) Gleason, Acanthospermum australe (Loefl.) Kuntze y
Xanthium strumarium L., ya que serán analizadas por primera vez, aportando a la
caracterización específica para estas drogas vegetales, contribuyendo a incrementar el
conocimiento morfoanatómico cuali-cuantitativo de las mismas.
Las muestras estuvieron constituidas por ejemplares frescos recolectados en la
ciudad de Posadas, Misiones; y en la ciudad de Oberá, Misiones. Los especímenes
herborizados se depositaron en el Herbario del Departamento de Farmacia de la
Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales de la Universidad Nacional de
Misiones.
Las especies fueron recolectadas e identificadas basándose en sus caracteres
morfológicos utilizando ejemplares de herbarios certificados (IBONE, 2020),
bibliografía especifica (Mitchell, 1971; Cialdella, 1986), claves dicotómicas (Boelcke,
1981; Burkart, Bacigalupo, 2005) y descripciones (Budel, Duarte, 2007; Aráujo y col.,
2013; Bhogaonkar, Amad, 2012; Silva-Brambilla, Moscheta, 2001; Cialdella, 1989).
Los equipos y materiales utilizados fueron la lupa Motic SMZ- 168, regla
milimétrica marca DIAMANTE, pinzas, agujas histológicas, portaobjetos, caja de Petri
y vaso de precipitado.
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Proceso de Diafanizado
La preparación del material se hizo empleando la técnica de Diafanización,
según el protocolo propuesto por C. Dizeo de Strittmatter (1973) modificada y descripta
por Zarkavsky (Zarkavsky, 2014). De cada especie y un individuo se tomaron 10 hojas,
utilizando azul de toluidina como colorante.
Índice de Estomas (IS)
A las 10 hojas de las cuatro especies se les contabilizó los estomas de un total
de 10 campos de la cara abaxial y 10 campos de la cara adaxial, contando las células
estomáticas como una sola.
El cálculo se realizó utilizando la fórmula propuesta (1) por las normas IRAM
37503 (IRAM 3, 2017a):
Donde S es el número de estomas y E el número de células epidérmicas en el
área delimitada.
La DS (densidad estomática) se obtuvo mediante la división del número de
estomas dividido un área delimitada de 1mm2.
Índice de Empalizada (IE)
El índice de empalizada se determinó mediante la observación de 10 campos de
la epidermis superior en las 10 hojas de cada una de las especies. La observación se
realiza delimitando cuatro células epidérmicas adyacentes y enfocando el parénquima
en empalizada en sección transversal. Se cuentan las células en empalizada que se
encuentran por debajo de 4 células epidérmicas. Si una célula no queda incluida
completamente, se la incluye sólo si más de la mitad está comprendida dentro del área
de esas cuatro células epidérmicas (IRAM 3, 2017b). Siguiendo la siguiente formula (2)
donde CE representa el número de células en empalizada, y 4Cep cuatro células
epidérmicas.
(2)
Mediciones de los elementos celulares
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Las descripciones de los elementos celulares se realizaron utilizando la cámara
Moticam10 acoplada al microscopio Motic BA200 y la medición de los mismos se
efectuó con el software Image J1.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Acanthospermum australe (Loefl.) Kuntze
En vista superficial, la epidermis abaxial presenta células con contornos
sinuosos (Figura 1, A, 1) y la adaxial, poligonales (Figura 1, B, 1). Los estomas son
frecuentes del tipo anomocítico y presentes en ambas caras (Figura 1, A, 2; Figura 1, B,
2). Asimismo, en ambas superficies se encuentran tricomas de cubierta pluricelulares
uniseriados (Figura 2, A) y tricomas glandulares con cabezuela de gran tamaño
conformada por 2 células (Figura 2, B).
En el corte transversal de la hoja se observa un mesófilo de estructura
dorsiventral, con clorénquima en empalizada 1-estratificado y parénquima esponjoso
formado por varias capas de células pequeñas. En la nervadura central, el haz vascular
es dorsiventral y posee forma lenticular.
Figura 1. A) 1. Célula epidérmica abaxial. 2. Estoma anomocítico de la cara abaxial.
B)1. Célula epidérmica adaxial. 2. Estoma anomocítico de la cara abaxial.